コロナの関係の試験法の開発・バリデーションガイドラインを発出

FDAは、3月16日(東部時間)コロナの関係で、試験法の開発・バリデーションガイドラインを発出しました。

Policy for Diagnostic Tests for Coronavirus Disease-2019

https://www.fda.gov/media/135659/download

1. Validation All clinical tests should be validated prior to use. In the context of a public health emergency, it is especially important that tests are validated as false results can have broad public health impact beyond that to the individual patient. FDA has provided recommendations regarding the minimum testing that should be performed to ensure analytical and clinical validity in section V below. FDA encourages laboratories to discuss any alternative testing with FDA that they would like to conduct.

1.バリデーション

すべての臨床検査は、使用前にバリデーションする必要があります。 公衆衛生上の緊急事態の観点から、誤った結果が個々の患者に対してそれ以上の広範な公衆衛生影響を与える可能性があるため、テストがバリデーションされることが重要です。 FDAは、以下のセクションVで分析および臨床的妥当性を確保するために実行する必要のある最小限のテストに関する推奨事項を提供しています。 FDAは、臨床試験室が実施を希望する代替試験についてFDAと協議することを推奨します。

2. FDA Notification Following completion of assay validation, laboratories should notify FDA (e.g., e-mail to CDRH-EUA-Templates@FDA.HHS.GOV) that their assay has been validated. This notification should include the name of the laboratory, name of the lab director, address, and contact person in this email. FDA will acknowledge receipt of this notification via auto-reply. As noted above, FDA recommends that laboratories submit a completed EUA request within 15 business days of the initial communication to FDA that the assay has been successfully validated.4

It would be helpful to FDA if laboratories provide information on testing capacity. This information will help the Agency and Department monitor the landscape as we work to ensure adequate testing capacity across the country.

FDA通知アッセイのバリデーションの終了後、臨床試験室は、FDAにアッセイのバリデーションされたことを通知する必要があります（CDRH-EUA-Templates@FDA.HHS.GOVへの電子メールなど）。 この通知には、この電子メールにラボの名前、長の名前、住所、連絡先を含める必要があります。 FDAは、自動返信によりこの通知の受信を確認します。 上記のように、FDAは、バリデーションが行われたというFDAへの最初の連絡から15営業日以内に、臨床試験室がEUAリクエストを提出することを推奨します。検査機関が検査能力に関する情報を提供してくれれば、FDAには有益です。 この情報は、ＦＤＡと部門が国全体の適切なテスト能力を確保するために作業する際に状況を監視するのに役立ちます。

 

（1）検出限界

FDAは、検査試験室はSARS-CoV-2アッセイの検出限界（LoD）を考慮することを推奨しています。 FDAは一般に、LoDの決定のために、RNAまたは不活化ウイルスを人工または実際の臨床マトリックス（BAL液、putなど）にスパイクすることは求めません。FDAは、検査試験室が濃度ごとに3回繰り返しの希釈系列をテストし、最終濃度で20回繰り返し、検証することを推奨しています。 FDAは、20回の繰り返しで19回が陽性になる最低濃度をLoDと定義しています。 複数の臨床マトリックスを臨床検査の目的としている場合、FDAは、検査試験室がEUAにおいて、最も困難な臨床マトリックスの結果をFDA提出することを推奨します。 たとえば、呼吸器検体（例：,、 BAL、鼻咽頭（NP）スワブなど）を検査する場合、検査試験室はEUAリクエストにおいて、唾液の結果のみを含めること。

（2）臨床評価

検査用の既知の陽性サンプルがない場合、FDAは、最低30の反応性検体と30の非反応性検体を評価することにより、人工的に作成された臨床検体でアッセイのパフォーマンスを確認することをお勧めします。 人工的に作成された反応性検体は、RNAまたは不活化ウイルスを残りの臨床検体にスパイクすることで作成できます。その大部分は、NPスワブなどの上気道検体、または唾液などの下気道検体になります。

人工的に準備された20の臨床検体をLoDの濃度の1x-2x でスパイクし、残りの検体をアッセイのテスト範囲に広げます。 FDAは、性能の許容基準を陽性；LoDの濃度で95％の一致、他のすべての濃度および陰性検体で100％の一致と定義しています。

 

(3) 包括性

臨床検査機関は、提案された分子アッセイを検出できる公開されているSARS-CoV-2配列に対する同一性パーセントを示すin silico分析の結果を参照すること。 FDAは、公開されているSARS-CoV-2配列の100％が、選択されたプライマーとプローブで検出できると予測しています。

 

（4）交差反応性

FDAは、最低限、一般的な呼吸器細菌叢およびその他のウイルス病原体と比較したアッセイプライマーおよびプローブのin silico分析は、初期臨床使用に十分であると考えています。 FDAは、in silicoの交差反応性を、プライマー/プローブの1つと標的微生物に存在する配列との80％を超える相同性と定義しています。 さらに、FDAは、追加の交差反応性試験の試験を目的とするサンプルタイプの前後関係（文脈）から、制定されている実験室手順に従うことを推奨します。

• Antigen Detection Diagnostics

FDAは、SARS-CoV-2抗原診断検査を、臨床検体から直接SARS-CoV-2抗原を検出する検査と定義しています。 FDAは、SARS-CoV-2抗原検査のために以下のバリデーション試験を実施することを推奨：

・検出限界/分析感度

・交差反応性/分析特異性

・微生物干渉

・臨床合意試験

臨床合意試験は、テストのパフォーマンス特性（感度/ PPA、特異性/ NPAなど）を確立することを目的としています。 FDAは、ヒトの標本、できればSARS-CoV-2感染の有無にかかわらず患者採取した残りの標本で臨床的合意が確立されるべきであると考えています。 SARS-CoV-2陽性の臨床検体が得られない場合、余剰検体にSARS-CoV-2体をスパイクしてもかまいません。 複数の臨床マトリックスを要求するデバイスの場合、worstcaaseマトリックスを用いてバリデーション試験を行うことが望まれる。

• Serological Diagnostics

血清学的検査

FDAは、SARS-CoV-2血清学的診断検査を、臨床検体からSARS-CoV-2に対する抗体（IgM、IgGなど）を特定する検査と定義しています。 FDAは、SARS-CoV-2血清学的アッセイについて、以下のバリデーション試験を実施することを推奨；

・交差反応性/分析の特異性

・クラスの特異性

・臨床合意試験

臨床合意試験究は、テストのパフォーマンス特性（感度/ PPA、特異性/ NPAなど）を確立することを目的としています。 FDAは、微生物学的にCOVID-19感染が確認された患者よりの検体の臨床的精度を確立することを推奨。

の情報が掲載されています。